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# Protocolo del cubo de agua
NOTA: Esto es una [bricolaje](/methodology/es/foundations/bricolage.md) protocolo; lo que significa que lo estamos construyendo en público. ¡Algunas páginas están en construcción — pero vuelve pronto, se está actualizando rápido!
El Protocolo del Cubo de Agua es el método de campo de Savimbo para recolectar ADN ambiental (eDNA) en parcelas agroforestales, utilizado para cuantificar [el incremento de la biodiversidad](/methodology/es/biodiversity-credits.md) a lo largo del tiempo. Alimenta la [Unidad de Biodiversidad Interoperable (IBU)](/methodology/es/biodiversity-credits/biodiversity-unit.md) — el único instrumento de crédito de biodiversidad actualmente certificado. Esta página describe la metodología y sus limitaciones; para los pasos de implementación en campo, consulte la [Guía práctica](/practice-guide/es/edna/water-bucket-protocol.md).
Elegimos intencionalmente un nombre simple para una solución práctica a un problema de ciencia de vanguardia increíblemente complejo. La fuente multidisciplinaria del protocolo se describe en [Apéndice B](/methodology/es/apendices/wbp-case-study.md) y los autores contribuyeron significativamente a su refinamiento.
Para instrucciones paso a paso sobre el uso práctico en campo, consulte la Guía práctica [Protocolo del cubo de agua](https://sexytrees.savimbo.com/practice-guide/es/)
### **Propósito del WBP**
Este protocolo tiene como objetivo estandarizar el análisis de eDNA de ciencia de vanguardia en sitios de campo remotos operados por jóvenes indígenas y locales.
**El protocolo del cubo de agua estandariza la recolección de datos de eDNA.** Al usar agua filtrada, un período de tiempo estandarizado y centroides de parcela, reduce el ruido y mejora la señal en la recolección de datos de eDNA. Para recapitular la [Cálculo de biodiversidad](/methodology/es/biodiversity-credits/calculation.md) sección, esto ofrece un enfoque coherente para comparar sitios a lo largo del tiempo y evaluar cambios en la integridad del ecosistema.
**El objetivo es reducir costos y mejorar la precisión al usar eDNA como métrica**. Los resultados deberán normalizarse estadísticamente a una curva estandarizada por proyecto para el aumento de la integridad a lo largo del tiempo. El WBP simplemente facilita esto al reducir los datos disponibles a un conjunto más significativo, reduciendo el tamaño de muestra necesario para cumplir con los requisitos de salida de las Unidades de Biodiversidad Interoperables (IBU) y calificar para ingresos recurrentes por créditos de biodiversidad por incremento (aproximadamente $300/unidad, véase [Unidad de biodiversidad](/methodology/es/biodiversity-credits/biodiversity-unit.md)).
#### Limitaciones del WBP
Existen importantes limitaciones prácticas para las pruebas de eDNA en campo. La ausencia de niveles de referencia de eDNA establecidos en todos los ecosistemas sigue siendo el principal desafío para usar eDNA en evaluaciones de aumento de biodiversidad mediante IBU, agravado por las dificultades logísticas de exportar muestras y por los costos del análisis para obtener métricas de eDNA. Un posible enfoque es establecer un muestreo de referencia de eDNA en bosques prístinos o de crecimiento antiguo, representando la conservación en la Fig. 4C. Las métricas tradicionales simples de biodiversidad, como la riqueza de especies, son adecuadas para el monitoreo comunitario, pero tienen bajo poder estadístico y, por lo tanto, requieren un esfuerzo de muestreo considerable para detectar de forma fiable los cambios ecológicos [(Lamb et al. 2009)](https://doi.org/10.1016/j.ecolind.2008.06.001).
El error aleatorio en las muestras de eDNA también puede ser alto y afectar la integridad de los datos [(Lahoz-Monfort et al. 2016)](https://doi.org/10.1111/1755-0998.12486). Por lo tanto, el monitoreo rentable requiere un muestreo estadísticamente sólido, idealmente con curvas normalizadas regionales, aunque estas pueden ser más costosas de desarrollar en zonas más biodiversas.
Dicho esto, creemos en avanzar los límites cuando los encontramos, de la manera más práctica posible. El protocolo que sigue está destinado a reducir el ruido de muestreo de una manera rentable.
#### **Ubicación de muestreo**
Aunque nuestros cálculos de IBU están diseñados para áreas de una hectárea, el muestreo se realiza en el centroide de una parcela (promediando cinco hectáreas) para optimizar las condiciones del propio sistema agroforestal, en lugar de la biodiversidad que tiende a acumularse en los bordes de las áreas cultivadas. El tamaño de la parcela debe utilizarse como covariable en el modelado estadístico posterior (véase[ Cálculos de biodiversidad](/methodology/es/biodiversity-credits/calculation.md)).
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