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# Protocolo do balde de água
OBSERVAÇÃO: Isto é um [bricolagem](/methodology/pt-br/foundations/bricolage.md) protocolo; isso quer dizer que estamos construindo ele em público! Algumas páginas estão em construção — mas volte em breve, porque ele está sendo atualizado rápido!
O Protocolo do Balde de Água é o método de campo da Savimbo para coletar DNA ambiental (eDNA) em parcelas agroflorestais, usado para quantificar [o aumento da biodiversidade](/methodology/pt-br/biodiversity-credits.md) ao longo do tempo. Ele alimenta a [IBU (Unidade Indicadora de Biodiversidade)](/methodology/pt-br/biodiversity-credits/biodiversity-unit.md) — o único instrumento de crédito de biodiversidade hoje certificado. Esta página descreve a metodologia e suas limitações; para os passos de implementação em campo, veja o [Guia Prático](/practice-guide/pt-br/edna/water-bucket-protocol.md).
Escolhemos de propósito um nome simples para uma solução prática para um problema de ciência de fronteira incrivelmente complexo. A origem multidisciplinar do protocolo é descrita em [Apêndice B](/methodology/pt-br/apendices/wbp-case-study.md) e os Autores contribuíram de forma importante para seu aperfeiçoamento.
Para instruções passo a passo sobre o uso prático em campo, veja o Guia Prático [Protocolo do Balde de Água](https://sexytrees.savimbo.com/practice-guide/pt-br/)
### **Objetivo do WBP**
Este protocolo serve para padronizar a análise de eDNA de ciência de fronteira em locais remotos de campo operados por jovens Indígenas e de comunidades locais.
**O protocolo do balde de água padroniza a coleta de dados de eDNA.** Ao usar água filtrada, um período de tempo padronizado e os centroides das parcelas, ele reduz o ruído e melhora o sinal na coleta de dados de eDNA. Para recapitular a [Cálculo da biodiversidade](/methodology/pt-br/biodiversity-credits/calculation.md) seção, isso oferece uma abordagem consistente para comparar locais ao longo do tempo e avaliar mudanças na integridade do ecossistema.
**O objetivo é reduzir custos e melhorar a precisão ao usar eDNA como métrica**. Os resultados precisarão ser normalizados estatisticamente para uma curva padronizada por projeto para aumento da integridade ao longo do tempo. O WBP simplesmente torna isso mais fácil ao reduzir os dados disponíveis a um conjunto mais significativo, reduzindo o tamanho da amostra necessário para atender aos requisitos de saída para Unidades Indicadoras de Biodiversidade (IBU) e qualificar para receita recorrente de créditos de biodiversidade de aumento (cerca de US$300/unidade, veja [Unidade de biodiversidade](/methodology/pt-br/biodiversity-credits/biodiversity-unit.md)).
#### Limitações do WBP
Há sérias limitações práticas para testar eDNA em campo. A ausência de níveis de referência de eDNA estabelecidos entre ecossistemas continua sendo o principal desafio para usar eDNA em avaliações de aumento da biodiversidade via IBUs, somado às dificuldades logísticas de exportar amostras e aos custos da análise para obter métricas de eDNA. Uma abordagem possível é estabelecer uma amostragem de linha de base de eDNA em florestas intactas ou de crescimento antigo, representando conservação na Fig. 4C. Métricas simples e tradicionais de biodiversidade, como riqueza de espécies, funcionam bem para monitoramento baseado na comunidade, mas têm baixo poder estatístico e, por isso, exigem grande esforço de amostragem para detectar mudanças ecológicas com confiabilidade [(Lamb et al. 2009)](https://doi.org/10.1016/j.ecolind.2008.06.001).
O erro aleatório em amostras de eDNA também pode ser alto e afetar a integridade dos dados [(Lahoz-Monfort et al. 2016)](https://doi.org/10.1111/1755-0998.12486)O monitoramento com bom custo-benefício, portanto, exige amostragem estatisticamente robusta, idealmente com curvas normalizadas regionais — embora elas possam ser mais caras para desenvolver em zonas mais biodiversas.
Dito isso, acreditamos em avançar os limites onde os encontramos, da forma mais prática possível. O protocolo abaixo foi feito para reduzir o ruído da amostragem de forma econômica.
#### **Local de amostragem**
Embora nossos cálculos de IBU sejam projetados para áreas de um hectare, a amostragem é feita no centróide de uma parcela (média de cinco hectares) para otimizar as condições do próprio sistema agroflorestal, e não a biodiversidade que tende a se acumular nas bordas das áreas cultivadas. O tamanho da parcela deve ser usado como covariável em modelagens estatísticas posteriores (veja[ Cálculos de biodiversidade](/methodology/pt-br/biodiversity-credits/calculation.md)).
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