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# Protocolo del cubo de agua

<mark style="color:$danger;">Esto es un</mark> [<mark style="color:$danger;">bricolaje</mark>](broken://pages/52e1c204a9ab00c92981e8db0a2a870e372d9d3f) <mark style="color:$danger;">protocolo; ¡lo que significa que lo estamos construyendo en público! Algunas páginas están en construcción — pero vuelve pronto, ¡se actualiza rápido!</mark>&#x20;

La guía práctica de campo para el Protocolo del Cubo de Agua (WBP). Para teoría y ciencia, consulta Metodología [Protocolo del Cubo de Agua](/es/biodiversity-credits.md).

#### **Materiales**

* Cuatro cubos de origen local, esterilizados
* Solución de lejía al 10 % (para esterilización); agua limpia (para enjuague)
* \~4 L de agua filtrada para llenar
* Una botella de muestra de 1 L esterilizada y enjuagada dos veces
* Guantes y mascarillas
* Kit de filtración SimplexDNA ([simplexdna.com](https://www.simplexdna.com/))
* KoboToolbox o equivalente para la captura de datos de campo

La coloración de los cubos debe seguir un esquema consistente: colores claros para atraer polinizadores, colores oscuros o de tonos terrosos para atraer insectos que habitan en la madera. El material, la forma y el color del cubo pueden variar entre experimentos, pero deben mantenerse constantes dentro de un mismo muestreo y ajustarse a los objetivos de la recopilación de datos.

#### **Procedimiento**

1. **Esterilizar.** Limpia cada cubo con una solución de lejía al 10 % y enjuágalo dos veces con agua. Para evitar la contaminación cruzada, esteriliza en el lugar en el campo o sella los cubos durante el transporte desde el sitio de desinfección.
2. **Colocar.** Coloca los cuatro cubos alrededor del centroide de la parcela, aproximadamente a 10 m de distancia entre sí. Estabilízalos para que no puedan volcarse: sujétalos con palos en terrenos inclinados; ponles peso con piedras donde haya animales de pastoreo. Mantén una colocación consistente entre parcelas (siempre al aire libre, o siempre cerca de arbustos): la comparabilidad entre sitios importa más que cualquier elección de colocación individual.
3. **Llenar.** Añade aproximadamente 1 L de agua filtrada a cada cubo. Coloca un palo tomado del área circundante en el agua para que cualquier insecto que caiga dentro pueda salir; queremos su eDNA, no los insectos en sí.
4. **Exponer durante 72 horas.** Dejar sin perturbar.
5. **Observar.** Regresa después de 72 horas y registra para cada cubo: si llovió durante el período de exposición, el nivel de llenado y la presencia de cualquier organismo vivo o muerto. Fotografía cada cubo.
6. **Compuesto.** Con guantes y mascarilla, usa la botella esterilizada de 1 L para medir un litro de cada cubo y combina los cuatro en uno de los cubos restantes en el sitio.
7. **Filtrar y almacenar.** Filtra la muestra compuesta utilizando el kit SimplexDNA. El kit funciona de forma manual (accionado por jeringa), es intuitivo en el campo y almacena el filtro en un tampón que preserva el ADN a temperatura ambiente — una ventaja práctica importante donde no hay refrigeración disponible. El volumen filtrable varía según la cantidad de residuos; el filtro se obstruye progresivamente y puede requerir bastante fuerza hacia el final de la filtración.

#### **Figura X. Protocolo del cubo de agua, cubos de colores**


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